Wnt1诱导分泌蛋白1在直肠癌中的表达及其临床意义
Wnt 1诱导分泌蛋白1在直肠癌中的表达及其临床意义 毕业论文 作者：田超 周总光 孟文建 李立 于永杨 杨烈 雒洪志 周宾 【摘要】 目的 定量检测Wnt 1诱导分泌蛋白1(Wnt 1 induced secreted protein 1，WISP 1)基因在人直肠癌及远端正常直肠组织中的表达，为进1步研 究该基因功能提供线索。方法 提取人直肠癌及癌旁正常直肠组织总RNA，采用 实时RT PCR分析WISP 1的表达，再对PCR结果进行分析。结果 WISP 1 mRNA在直肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁正常直肠组织，差异有统计学意 义(P0.05)。WISP 1的表达与肿瘤的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移等因素 有相关性。结论 WISP 1基因的异常表达可能与直肠癌的发生、发展有关，有 望成为直肠癌诊断预后的标志物和治疗的新靶点。【关键词】 Wnt 1诱导分泌蛋白1基因；
直肠肿瘤；
mRNA Expression of Wnt 1 induced secreted protein 1 in rectal cancer and its clinical significance 【Abstract】 Objective To provide basis for further study of Wnt 1 induced secreted protein 1 (WISP 1) gene by quantitatively detecting its expression in rectal cancer tissues and distal normal rectal tissues. Methods Real time RT PCR was used to detect the expression of WISP 1 mRNA in 86 samples of rectal cancer tissues and distal normal rectal tissues. Results The average level of WISP 1 mRNA expression in rectal cancer tissues was 7.744 times than that in normal rectal tissues, with statistical significance (P0.05). The level of WISP 1 mRNA expression was correlated with tumor differentiation, Dukes stage and lymph node metastasis. ConclusionsThe abnormal expression of WISP 1 gene may play an important role in the carcinogenesis and development of rectal cancer. WISP 1 may be helpful for prognostic evaluation and gene therapy in rectal cancer. 【Key words】 Wnt 1 induced secreted protein 1 gene;
Rectal caner;
mRNA 1 材料与方法 1.1 标本取材收集4川大学华西医院普外科2003-2004年确诊的86例直肠癌患者资料，其 中男44例，女42例。各病例分别取直肠癌组织以及相邻远端正常直肠黏膜组织。
组织在离体30 min内取材， 并于液氮速冻置于-70 ℃冰箱保存备用。所取标本 均经病理检查证实。
逆转录酶M MLV为Takara公司产品；
Trizol试剂为Gibco公司产品；
DEPC、 DNaseⅠ、 RNase为Sigma公司产品；
引物和探针由Takara公司合成。
1.3 总RNA提取及逆转录反应 1.4 实时RT PCR反应 1.5 扩增效率及产物分析 1.6 统计学分析 用相对表达软件工具 XL［4］对RT PCR结果进行分析，揭示直肠癌组 织及正常直肠组织两组间WISP 1的表达是否有差异。利用SPSS 11.0软件包中 Chi 检验和秩和检验分析WISP 1与临床病理指标之间的关系。P0.05为差异有 统计学意义。
2 结果 2.1 总RNA电泳检测及定量 2.2 RT PCR扩增效率和线性关系 GAPDH及WISP 1扩增效率分别是1.61及1.85。线性关系为r=1。
2.3 WISP 1基因在直肠组织中的表达 86例直肠癌样本中有56例过度表达，其中有17例直肠癌中的表达是正常直 肠组织的1～5倍，有5例是6～10倍，有34例是超过10倍。REST 结果显示在直 肠癌中WISP 1的平均表达水平是正常直肠组织的7.744倍，两组表达量的差别 有统计学意义(P0.05)，说明WISP 1基因在直肠癌中的表达上调。
2.4 WISP 1基因水平与临床病理指标的关系它与直肠癌的分化程度、Dukes分期及淋巴结转移有关，与年龄、性别及 CEA等临床病理因素无明显相关性(表1)。表1 86例直肠癌患者Wnt 1诱导分泌 蛋白1表达水平与临床病理资料的关系（略） 3 讨论