治疗颈椎病的新药复方芪麝片的工艺研究
治疗颈椎病的新药复方芪麝片的工艺研究 作者：刘梅，张宁，王拥军，张钰泉，周重建 【摘要】 目的确定复方芪麝片中青风藤、防己药味提取工艺。方法采用 正交实验法以粉防己碱和青藤碱含量为指标，考察乙醇浓度、乙醇量、提取时间、 提取次数4个因素对青风藤等药味提取工艺的影响。结果药材以70%的乙醇为提 取液，加醇量为药材的14倍，提取3次，2 h/次。结论该优化工艺可行。【关键词】 复方芪麝片；
正交实验；
提取工艺；
粉防己碱和青藤碱 复方芪麝片为主治气虚血瘀兼痰湿阻络型颈椎病的中药复方制剂,由黄芪、 麝香、青风藤、川芎等中药组成,具有益气活血、化痰通络、消肿止痛的作用， 临床效果较好。方中青风藤为臣药，防己为佐药，其主要有效成分均为生物碱， 即粉防己碱和青藤碱。现代药理研究证实青藤碱具有抗炎、免疫抑制、镇痛、降 压、抗心律失常等药理作用［1,2］。易丹丹等［3］研究发现青藤碱凝胶对大鼠 佐剂性关节炎具有治疗作用,且效果良好。粉防己碱具有广谱抗炎作用, 对局部和 全身的多种急、慢性炎症、免疫性炎症、烟雾吸入性肺损伤、四氯化碳性肝损伤 均有显著的抑制作用，其抗炎作用是多方面的,对炎症的各个环节均有不同程度 的抑制作用［4,5］。Www.133229.CoM此外粉防己碱还具有抗心肌缺血、抗肿 瘤等作用［6,7］。根据方中两药味有效成分理化性质的特征，本研究选择乙醇 作为提取溶剂，拟通过正交实验对醇提工艺中乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、 提取次数这4个因素进行考察，以粉防己碱和青藤碱含量为指标成分筛选工艺条 件。
1 材料与仪器 防己购自上海养和堂药材有限公司，经上海中医药大学生药教研室鉴定为 防己科植物粉防己stephania tetrandra s. moore的干燥根。
青风藤购自上海养和堂药材有限公司，经上海中医药大学生药教研室鉴 定为防己科植物青藤sinomenium acutum (thunb.) rehd. et wils.及毛青藤s.acutum (thunb.)rehd. et wils. var. cinerum rehd.et wils.的干燥藤茎。
粉防己碱、青藤碱对照品：含量测定用，由中国药品生物制品检定所提供。
agilent 1100色谱工作站。2 方法与结果 2.1 因素水平表根据文献资料和预实验结果，采用正交实验法以乙醇 浓度（a）、乙醇用量（b）、提取时间（c）、提取次数（d）为考察因素，各取 3水平，具体因素水平见表1。表1 提取工艺优选水平（略） 2.2 醇提实验根据表1，选用l9正交表，按各实验号进行实验。每次实 验按处方量称取青风藤120 g，防己90 g，加热回流，提取液进行浓缩，称重，计 算得膏率，分别称取各组浸膏适量，甲醇溶解并定容至10 ml容量瓶中，得9组供 试品，分别测定青藤碱和粉防己碱的含量，测定青藤碱的hplc条件：十八烷基硅 烷为填充剂；
甲醇 乙腈 水 二乙胺（18∶14∶58∶0.1）为流动相；
检测波 长为265 nm。测定粉防己碱含量的hplc条件：十八烷基硅烷为填充剂；
甲醇 乙 腈 水 二乙胺（70∶10∶20∶0.1）为流动相；
检测波长为283 nm。
2.3 正交实验及方差分析见表2～3。表2 正交实验设计（略）表3 方 差分析（略） x：青风藤为方中臣药，防己为佐药，所以经过加权后，x=青风藤×60%+ 防己×40%。x1，x2分别表示两次重复实验所得数据经加权后的数值。
f0.05(2,17)=3.59,f0.01(2,17)=6.11,由方差分析表可知，4因素均有显著性 差异，根据实验结果, 因素d应取d3，即提取3次。因素b应取b3，即加10倍量醇。
因素a应取a2,即70%醇提。因素c 应取c2，即提取时间为2 h。
2.4 乙醇用量的单因素考察在其他因素确定的前提下，以粉防己碱和 青藤碱含量为指标成分考察乙醇用量为14倍，18倍时工艺提取情况。结果见表4。
表4 乙醇用量的单因素考察（略） 乙醇用量为14倍时，提取的指标成分含量高，因此确定乙醇用量为14倍。
2.5 工艺验证取同样药材，按上述优选工艺进行操作，粉防己碱含量 为0.34%。青藤碱含量为0.58%（与药材比）。
3 讨论 根据正交实验，确定防己和青风藤最佳提取工艺为以70%醇浓度的乙醇为提取液，加醇量为药材的16倍，提取3次，2 h/次。
防己、青风藤提取工艺中所依据的指标，采用的是将粉防己碱和青藤碱含量 进行加权后的数值。加权系数应根据两味药物在方中所起的作用进行慎重选择， 本实验确定臣药青风藤的加权系数为0.6，佐药防己的加权系数为0.4。
正交实验中，因素b和d均具有显著性差异，根据极差分析，所取水平均为 设定的最高水平，因此应考察加醇量在10倍以上，提取次数在3次以上时的情况。
结合大生产的实际情况和两因素的交互作用，确定提取次数为3次，在此基础上， 对乙醇用量进行单因素考察，实验结果表明，当乙醇用量为药材量的14倍时，成 分含量较高，提取较完全。