玉米须对2型糖尿病模型大鼠降糖机制讨论
玉米须对2型糖尿病模型大鼠降糖机制讨论 玉米须是禾本科玉蜀黍属植物玉米stigma maydis L.的花柱和柱头，含有甾 醇、多糖、皂苷、黄酮等化学成分，具有降血糖、抗氧化、抗肿瘤及免疫调节等 作用，民间常以玉米须做药茶用于糖尿病、高血压病的辅助治疗。目前，玉米须 的降糖机制研究集中于其能够促进肝糖原、肌糖原的合成及保护胰岛细胞等功能， 而对2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus，T2DM)因脂质代谢紊乱诱发的胰岛素抵 抗研究尚不充分。富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(secreted protein acidic and rich in cysteine，SPARC)是一种组织细胞分泌性基质蛋白，是引起胰岛素抵抗的一个诱 因。本研究通过建立T2DM大鼠模型，考察玉米须对模型大鼠脂肪组织SPARC表 达的影响，并观察胰腺病理结构的改变，探讨玉米须治疗糖尿病的作用机制。材料 1. 药材与试剂 玉米须药材购于安国市奉义中药饮片有限公司，经黑龙江 省中医药科学院王伟明教授鉴定为玉米须stigma maydis L.;链脲佐菌素(STZ，美 国Sigma公司);血糖试纸(罗氏公司);RNA提取试剂(Trizol);RNA逆转录试剂盒 (TaKaRa);PCR试剂盒(TaKaRa);SPARC及内参(-actin)引物(Invitrogen公司);蛋白 裂解液及BCA试剂盒(中国碧云天生物试剂公司);内参(-actin)抗体及SPARC单克 隆抗体(Abcam公司);内参二抗及SPARC二抗(北京中杉金桥生物技术有限公 司);ECL显色试剂盒(英国安马西亚公司)。
2 . 仪器 AC C U- C H E K型血糖仪(德国罗氏公司);LineGene 9600聚合酶 链式反应(PCR)仪(杭州博日科技有限公司);VersaDoc MP 5000凝胶成像仪 (BIO-RAD公司);TY10170-3930型WESTERN BLOT湿法转膜仪(BIO-RAD公 司);DYCZ-24DN型电泳仪(北京六一公司);infinite M200PRO酶标仪(瑞士Tecan公 司)。
3. 动物及饲料 SPF级SD雄性大鼠，体质量(20020)g，由北京维通利华实 验动物技术有限公司提供，生产许可证号：SCXK(京)2012-0001，合格证号：
11400700049303;高脂饲料由实验室按如下配方配制：基础饲料79.5%、蛋黄粉 10%、猪油10%、猪胆盐0.5%。
方法 1. 玉米须提取物的制备称取玉米须500g，将其切短，用10倍量水室温浸泡10h，于80℃水浴中浸 提2次，每次3h，过滤，合并滤液，于80℃减压浓缩并真空干燥，保存于-20℃备 用。临用时，取适量加蒸馏水溶解配制成0.1g/mL的溶液。
2. 糖尿病模型的建立