不同产地黄芩样品中主要有效成分含量的对比研究
不同产地黄芩样品中主要有效成分含量的对比研究 资料显示,黄芩别名山茶根、土金茶根,是唇形科黄芩属的一种多年生草 本植物,药用部位取其干燥根,味苦、性寒、有清热燥湿、泻火解毒、止血、安 胎功效。黄芩的临床抗菌应用效果优于黄连,并且没有抗药性,故在临床上应用 广泛。药用中应用的黄芩主要成分有黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷等, 但由于产地不同,会导致黄芩中的成分的差异,现对常用的河北、内蒙、甘肃三 产地黄芩进行含量测定比较,将结果报道如下。1 实验仪器与方法 1.1 实验仪器与试剂 Agilentl10 高效液相色谱仪(配 DAD 检测器),色谱柱:DiamondC 柱(以 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂);测定黄芩中苷类以甲醇 - 水 - 磷酸(47 ∶ 53 ∶ 0.2)为流动相;测定苷元类用甲醇 -乙腈 -0.4%的冰醋酸水溶液(30 ∶ 20 ∶ 50)为流动相;检测波长为 280nm;流速 10mLmin-1,柱温25℃,理论板数按黄芩 苷峰计算应不低于 2500。甲醇 ( 色谱纯 );磷酸 ( 分析纯 );水为超纯水;对照品 黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素均购自中国药品生物制品检定所,纯度为 99%。
药材黄芩药材分别选自河北、内蒙古、甘肃三地,经吉林省食品药品检验 所鉴定均为唇形科植物黄芩的干燥根。
1.2 方法 1.2.1 对照品溶液的制备 分别精密称取在 60℃减压干燥 4h 的黄芩素、 汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷对照品适量,精密称定,分别加甲醇制成每 lmL 含 60g 的溶液,用微孔滤膜过滤得对照品溶液。
1.2.2 供试品溶液的制备 参照 2010 版药典标准,黄芩苷、汉黄芩苷供试 品制备:选自三个产地的黄芩分别在 60℃减压干燥至恒重,过 40 目筛,精密 称取样品 0.3g。经加热回流、过滤、定容等操作制得供试品溶液。黄芩素、汉 黄芩素供试品制备:精密称取三产地的黄芩样品各自 0.3g,过 40 目筛,60℃ 减压干燥至恒重,经提取、蒸发、溶解、定容等步骤制得。
1.2.3 重复性实验 取同一批次样品 3 份,按照上述供试品配制方法进行制备。
1.2.4 稳定性实验 取供试品溶液,分别于 0、2、4、8、16h 进样 10L, 分别记录峰面积。
1.2.5 回收率实验 精密称取 4 份过 40 目筛的60℃减压干燥至恒重的黄 芩样品 0.15g,分别精密称取黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷对照品0.15g, 按照 2.2 方法每份样品制成 5 份,测定 4 种主要成分的峰面积。
1.3 统计学处理 采用 SPSS17.0 统计学软件进行数据分析,计量资料采用 x2检验,P 0.05 为差异具有统计学意义。
2 结果 2.1 重复性试验 按 2.7 方 法 进 行 测 定,依 据 结 果 计 算 RSD 3%,说明样品重 复性很好。
2.2 稳定性实验 黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷 RSD 值分别为 0.76%、0.97%、 1.12%、0.62%,表明供试品在制备后 16h 内稳定。
2.3 回收率实验 测定黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素的峰面积。平均回收率分别为 99.6%、98.7%、99.5%、99.1%,RSD 分别为 0.89%、1.64%、0.96%、1.25%。
3 讨论 中药黄芩为多年生草本,根茎肥厚,肉质,径达2cm,伸长而分枝。黄芩 抗旱力较强。遇严重干旱或追肥后可适当浇水,一般不用常浇水。主要分布在中 国河北、山西北部、内蒙古中东部及东北三省大部。黄芩中含有多种黄酮类化合 物,其主要活性成分是黄芩苷、汉黄芩苷、黄芩素和汉黄芩素。其活性成分的多 寡也是评价黄芩优劣的指标。现代药理学指出,黄芩具有抗炎、抗菌、抗病毒、镇静、解毒、解热、降 压等功效,黄芩煮水又具有清热止血效果,此外黄芩配山栀、桔梗、当归、人参 等制成汤剂对糖尿病也有一定的疗效,在临床应用比较广泛。由于黄芩生长的地 理位置,光照、土壤酸碱度及温度等因素的影响,所以不同产地的黄芩药材中的 主要有效成分也有所差别。
故本研究选取河北、内蒙古、甘肃三产地黄芩样品,按照《中国药典》2010 版一部标准,对三产地样品进行黄芩素、汉黄芩素、黄芩苷、汉黄芩苷有效成分 的测定,测定结果显示黄芩样品中黄芩苷、汉黄芩苷的含量河北内蒙古甘肃,而 黄芩素、汉黄芩素的含量内蒙古河北甘肃,所以根据研究结果在临床制剂中应根 据不同药用作用选择合适产地的黄芩入药。