微柱凝胶在临床输血中的应用
微柱凝胶在临床输血中的应用 摘 要:目的:观察微柱凝胶技术在检测临床配血标本中的作用,探讨其 在临床输血中的价值。方法:对血样标本给予微柱凝胶法和凝聚胺交叉配血法, 进行配血试验;用微柱凝胶卡做抗体筛查,微柱凝胶法和试管法同时进行直接抗 人球蛋白试验,对比结果。结果:采用微柱凝胶技术进行交叉配血与凝聚胺交叉 配血法,对不完全抗体的检出率差异无统计学意义(P>0.05);
交叉配血不合 标本用两种方法进行DAT试验,阳性率差异无统计学意义(P>0.05);
两种方 法进行DAT试验,以试管法为金标准,微柱凝胶法敏感性为96.0%、特异性为 90.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:微柱凝胶技术用于临床血型血清 学检测中,具有灵敏度高、结果保存时间短、标本用量少、操作简便等优点,具 有临床推广价值。
关键词:安全输血;
交叉配血;
微柱凝胶技术;
凝聚胺交叉配血法 临床安全输血中的首要保证是进行准确血型鉴定、交叉配血,同时这也是 避免临床发生溶血性输血反应的重要环节[1]。微柱凝胶技术作为新的免疫学检 测技术,应用于直接抗人球蛋白试验(DAT)中具有一定优势,逐渐为人们所接 受并广泛应用于临床血型血清学检测。吉林省延边大学附属医院对需要输血的患 者采用微柱凝胶法进行交叉配血与凝聚胺交叉配血法进行比较,同时将直接抗人 球蛋白试验的微柱凝胶法与试管法进行比较,现将结果报告如下。
1 资料与方法 1.1 一般资料:选取本院2010年2月~2011年2月各科室需输血的366例患 者,用含有EDTA-K2抗凝剂的真空采血管采集患者血液5 ml,混匀并离心备用, 取抗凝血标本进行试验;
供血血源来自无偿献血者。
1.2 仪器与试剂:微柱抗人球蛋白交叉配血卡、试管、微柱凝胶卡专用离 心机、普通血清学专用离心机、微量加样器、37℃免疫微柱孵育器,均为戴安娜 公司产品;
凝聚胺试剂为贝索公司提供;
抗体筛选细胞为上海血液生物医药有限 责任公司提供。
1.3 试验方法:对血样标本给予微柱凝胶法和凝聚胺交叉配血法,进行配 血试验;
其中交叉不合的标本用两种方法进行扶持,并采用微柱凝胶卡进行抗体 筛查,以及进行直接抗人球蛋白试验。1.3.1 交叉配血:按生产厂家所提供的说明书进行交叉配血,对366份标本采用微柱凝 胶配血卡和凝聚胺试剂进行交叉配血。
1.3.2 微柱凝胶卡抗体筛查试验:按生产厂家所提供的说明书进行,上述366分标本中 279份有妊娠史、输血史、交叉配血不合者进行本次抗体筛查试验。
1.3.3 DAT试验:交叉配血不合的12份标本进行DAT试验(同时进行试管法和微柱凝胶 法)。试管法具体操作按照传统抗人球蛋白试管法操作。具体操作可按厂家所提 供的说明书进行。
1.4 统计学方法:采用χ2检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果 2.1 交叉配血结果:366例交叉配血中:微柱凝胶法有4例主侧交叉不合, 7例次侧不合;
凝聚胺交叉配血法有3例主侧出现凝聚,4例次侧出现凝聚。两种 方法检出不完全抗体的差异无统计学意义(P>0.05)。
2.2 抗体筛查结果:279份标本进行微柱凝胶卡抗体筛查试验,结果有9例 出现阳性。
2.3 直接抗人球蛋白试验结果:12例交叉配血不合标本用两种方法进行 DAT试验,阳性结果分别有6例(50.0%)、5例(41.7%),差异无统计学意义 (P>0.05)。两种方法检测结果,以试管法为金标准,微柱凝胶法敏感性为96.0%、 特异性为90.2%,差异无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论 微柱凝胶技术基本原理是微柱凝胶的微孔过滤功能,免疫化学抗体特异性 反应可通过离心技术,把已经发生凝集反应的红细胞阻滞于凝胶内,未发生凝集 的单个红细胞可穿过微孔而到达柱底,因此,微柱凝胶技术具有区分凝集的功能 [2]。这种技术与传统方法相比,具有以下优点:无须洗涤、操作简便、试验所 需时间短;
试验结果清晰稳定、易于判读结果、易于保存;
试验经历的步骤经过 标准化,其自动化程度较高,且灵敏度高、特异性强、重复性好,能够减少标记 以避免错误,试验所需标本的量少[3]。我国目前主要使用的交叉配血法有凝聚胺法以及抗球蛋白法,凝聚胺法原 理是中和红细胞表面电荷,通过离心使红细胞非特异性凝集,改变液体环境使非 特异性凝集解聚,而特异性凝集不能被解聚,可检出不规则抗体。微柱凝胶法利 用生物化学凝胶过滤技术、离心技术、免疫化学抗体抗原特异反应,可以灵敏检 测出标本中可能存在的血型抗体。微柱凝胶技术相比凝聚胺法,对实验室操作人 员技术要求不高,存在对结果产生影响的因素较少,结果判读更为简单,具有临 床推广意义。