蚯蚓在兽医临床应用中药用价值的研究论文(共2篇)
蚯蚓在兽医临床应用中药用价值的研究论文(共2篇) 第1篇:蚯蚓药用价值的研究 蚯蚓属毛足纲寡毛目。利用蚯蚓中的药用活性成分是近年来发展起来的一 项新技术。1蚯蚓中氨基酸的药用作用 利用现在生物技术,可从蚯蚓中提取有一定抗癌作用的药品、溶解血栓的 药品、富含17种氨基酸的高级营养保健品、治疗烧伤烫伤的外用药。蚯蚓含有十 分丰富的营养成分,它的干体含纯蛋白质约70%,且蛋白质质量优良,含有17种 氨基酸,而且数量不少,为其他许多食物中所少有的。蚯蚓还含有磷、钙、铁、 钾、锌、铜、硒等矿物质和多种维生素。
2蚯蚓中硒的药用作用 蚯蚓含硒量高达20Pg,膳食硒日供给量范围为Pg/d,因此,只须在每天的 膳食中添加l0g左右的蚯蚓干粉,就可满足人体对必需微量元素硒的正常需要了。
3蚯蚓中的次生代谢物的药用作用 从蚯蚓中分离出一种狐类D-lombricine,并证明其具有抑制小鼠自发性乳 瘤生长的作用。构效关系研宄表明,乙烯基团的存在及其长度对胍类的抗肿瘤作 用具有重要意义,抗肿瘤活性的作用点位于胍乙基基团。不同给药途径影响抗肿 瘤作用,皮下注射时的作用强于口服给药。
药用蚯蚓在祖国医学里被称为地龙,有较独特的化学组成,如高的不饱和 脂肪酸含量,相对高丰度的Fe、Mn、Qi、Zn和Se等微量元素,以及蚯蚓素、蚯 蚓解热碱、蚯蚓毒和嘌呤、胆碱、胆甾醇等多种活性成分。我国对蚯蚓提取物抗 肿瘤作用的研宄报道多见于20世纪90年代。曾小澜(1995)发现,蚯蚓提取物在 体外对癌细胞有直接抑制作用。张绍章等在体内能调节荷瘤小鼠脾脏B细胞的增 生和分化,增强荷瘤小鼠的特异性免疫功能。孙淑芬等(1993)侧重其对放疗、化 疗等的增效作用,并认为作用机理与癌细胞内过多自由基的累积杀伤作用和增强 机体细胞免疫功能有关。然而,作为一组混和物,蚯蚓中抗肿瘤活性成分的化学 性质及其具体作用机制都没有得到更深入的研宄和阐明。本实验以赤子爱胜蚓 (正蚓科爱胜属)为材料,分离得到一组活性蛋白成分,对其体外及体内抗肿瘤活性进行了测定,从而为有效成分的进一步纯化和作用机制的研宄奠定了基础。
4蚯蚓中各种酶及其抽提物的药用作用 邢宝东等(997)、赵晓瑜等(998)、林少琴等(000)研宄了蚯蚓的成分组 成,发现各种酶类含量较高,如纤维蛋白溶解酶(纤溶酶)杨嘉树等(1998)研宄 了纤维蛋白溶解酶原激活酶(纤溶酶激酶)刘堰等(994)研宄了超氧化物岐化酶;
徐炜虹等(1994)研宄了过氧化氢酶;
严民宏等(1991)研宄了纤维素酶以及钟良玮 等(1991)研宄了胶原酶;
此外,国内对蚯蚓活性蛋白的纯化也有诸多研宄,李 令媛等(1991)研宄了金属硫蛋白;
王米芹等(1991)研究了钙结合蛋白和血小板 聚集剂等。笔者对赤子爱胜蚓抗肿瘤活性蛋白组分的纤溶酶和纤溶酶激酶活性进 行了分析。发现具有较强癌细胞杀伤活性的蚯蚓抽提物不仅同时含有纤溶酶和纤 溶酶激酶,而且进一步根据丝氨酸蛋白酶抑制剂实验发现相关酶类是该细胞杀伤 活性的必要成分。Yazawa(1990)提出蚯蚓提取物对内脏器官和神经系统有一定的 作用。陈飞等(2003)提出蚯蚓提取物不仅具有抗肿瘤的作用,对放疗、化疗和热 疗也有增效作用,其作用机理可能是增强机体免疫功能及自由基有关。
蚓激酶即蚯蚓纤溶酶,是一组从蚯蚓体内分离出的具有抗凝血作用的蛋白 酶。自20世纪80年代初日本MiharaH等首次发现粉正蚓水提物中有直接溶解纤维 蛋白以及激活纤溶酶原的活性物质以来,至今已经从不同种类蚯蚓体内提纯出多 种具有抗凝活性的蛋白组分。程牛亮等(1990)、熊焱等研宄发现蚓激酶是一类 复杂的蛋白酶,其复杂性表现在组分多样生、结构多样性、酶学特种蚯蚓体内能 分离出至少2种以上具有抗凝活性但是分子量和生化特征不相同的蛋白酶。例如 在粉正蚓(程牛亮等,、赤子胜爱蚓(熊焱等,1999)体内均分离出多种纤溶酶组 分。这些蛋白酶不仅分子结构、分子量上不同,而且对底物作用方式和作用位点 也有很大差别。粉正蚓的纤溶酶中有的可以水解碱性氨基酸,有的可以水解酸性 氨基酸;
李旭霞等(2003)提出赤子胜爱蚓纯化的组分中有的可以直接水解纤维蛋 白,也有的以纤溶酶原作为水解底物。日本宫崎医科大学的美原恒教授,利用蚯 蚓提取蛋白酶获得了成功,此药可以代替尿激酶,是治疗心肌梗塞、脑血栓的特 效药。
郭斗涛等(1998)报道,口服蚯蚓水提物30mlAl,14d(1个疗程)后,脑血栓 患者的血液流变学指标明显改善。董德洛等(1993)给脑血栓患者口服蚯蚓水提物 实验发现,该提取物可能通过抗凝及促纤溶作用,促进脑血栓患者神经功能缺损 的恢复。陈飞等(2003)指出蚯蚓的溶栓作用,侧重于脑血管病的预防和中风后遗 症的恢复。蚯蚓消化道中有10多种蛋白水解酶和纤溶酶。利用这些酶水解蛋白可获得 可溶性小分子的活性肽和氨基酸。蚯蚓提取物中钙调素,通过介导Ca2+信号传 导,它在调节细胞多种生理功能中起重要作用。蚯蚓CaM是一种分布很广泛,功 能重要的钙结合蛋白,作为主要的钙受体蛋白,调节着20多种酶的活性,在第二 信使调节系统中处于重要位置。
作者:邓振山1,张宝成2,孙志宏1(1延安大学生命科学学院,陕西延安 716000;
2.陕西理工学院生物系,陕西汉中723000) 第2篇:蚯蚓在兽医临床应用中的药用价值研究 近年来,随着畜牧业生态养殖观念的不断推广以及对蚯蚓的药用研究日益 増多,蚯蚓在兽医临床上的应用日趋广泛。据有关测定,蚯蚓含有蚯蚓解热碱、 蚯蚓毒素、琥珀酸、胆碱等成分,且含有多种氨基酸和特殊酶。蚯蚓可直接以鲜 活蚯蚓或干粉形式应用于动物疾病治疗,也可以提取物形式应用于动物疾病防控, 且具有药理活性显着,提取成本低廉,毒副作用较低,疗效确切等特点,具有抗 心律失常、解热、抗癌、平喘、降压、抗凝、抑制或促进血小板聚集、促进伤口 愈合、増强免疫、杀菌、通乳等功效。
1蚯蚓的主要药用形式 1.1鲜活蚯蚓或干粉蚯蚓在兽医临床上最为重要的应用形式即为鲜活蚯蚓 或干粉。蚯蚓体内含有蚯蚓素、蚯蚓碱、蚯蚓毒素及嘌呤、胆碱、胆甾醇等多种 特殊活性物质。还含有纤溶酶、蚓激酶、抗肿瘤蛋白等特殊酶,具有抑制血小板 凝聚、溶解血检、抑制肿瘤细胞生长。兽医临床上主要用于动物的细菌、病毒感 染性疾病及免疫性等疾病的治疗,其药用名为地龙,味咸,性寒,有清热镇痉, 利尿通淋滋补通乳,敛疮解毒,平喘通络等功效,主治高热惊狂,肺热咳喘,痉 挛抽搐,尿涩水肿等疾患。
1.2蚯蚓液提取物蚯蚓液包括蚯蚓原液、蚯蚓提取液、蚯蚓体腔液、蚯蚓 营养物液等,是从鲜蚯蚓中提取的体液、血液和细胞内外液或活性成分,或与其 他成分的复合制品。蚯蚓液中含有丰富的氨基酸和多肽,能直接为动物机体所吸 收,在杀伤肿瘤细胞、化学増效、辐射増效及提高机体免疫功能等方面具有重要 作用,主要用于防控细菌、病毒等感染性疾病及免疫性疾病。蚯蚓液中同时含有 丰富的矿物元素和维生素,尤其以铁及维生素B、B、C的含量最高,钾、铁、钙、钠、锌等含量较为丰富,还含有一定量的硒、猛等动物机体必需的微量元素。
1.3蚯蚓抗菌肽提取物抗菌肽是生物体免疫防御系统产生的一类对抗外源 性病原体致病作用的防御性多肽活性物质,是生物体先天免疫的重要组成成分, 与干扰素、补体等组成了宿主的免疫防御系统。蚯蚓抗菌肽具有分子量小、热稳 定、水溶性好、抗菌谱广及材料来源丰富等优点。蚯蚓及其制品中含有丰富的抗 菌肽,具有广谱抗菌作用、増强免疫力和抗肿瘤等特效。据吴海(2009)等111报 道,有人曾用硫酸铵对蚯蚓抗菌肽进行粗提,对其抗菌活性研究发现,蚯蚓抗菌 肽受温度以及值影响不大,温度在37~80°C范围内,P值在40~9.0范围内均有较强 的抗菌活性,仅需很低浓度就可产生明显的抗菌效果。抗菌肽可通过抑制有害菌 的生长,减轻动物肠道微生物与宿主的营养竞争,促进宿主对能量和营养物质的 吸收,达到发挥遗传潜力、提高生产性能,促进生长发育的目的。
14蚯蚓纤溶酶提取物蚯蚓纤溶酶是蚯蚓体内能溶解血纤维蛋白的酶类,不 仅能直接水解纤维蛋白,还能激活血纤维蛋白溶酶原成血纤维蛋白溶酶,从而具 有间接水解纤维蛋白的作用。动物在服用蚯蚓纤溶酶之后可产生明显的抗栓和溶 栓作用。蚯蚓纤溶酶的活性会随着值降低和温度的升高而逐渐降低,且在值为1 时或温度达到100°C时纤溶酶仍具有较强的活性。但蚯蚓纤溶酶在胃液的酸性条 件下或常规环境温度下难以完全灭活,因此将蚯蚓作为蛋白饲料或饲料添加剂使 用时应严格控制动物的摄入量121。
2兽医临床上的应用 2.1抗菌作用蚯蚓在受到机械、化学、电和热等刺激后,可分泌出花色的 体腔液,含有多种抗菌肽物质,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和 链球菌等均有良好的抑制作用。研究表明,蚯蚓提取液对巴氏杆菌、沙门氏菌、 大肠埃希菌等细菌具有良好的抑菌效果。李曾夏子等(2009)131采用蚯蚓原液的 抑菌率可达100%;
体内试验表明6mL剂量的原液对兔巴氏杆菌的治愈率为100%。
2.2提高机体免疫力研究发现,在肉鸡日常饮水中添加0.5%和1.5%蚯蚓提 取物,可使肉鸡的免疫器官指数、外周血AAE+淋巴细胞百分率、血清溶血素显 着提高,机体免疫功能増强,且能促进脾脏和胸腺发育,对法氏囊生长也有一定 的促进作用。
李荣等(2008)151研究发现0.1~0.5mgmL剂量的蚯蚓肽(EP)均可明显提高 淋巴细胞増殖率,増强巨噬细胞的细胞毒效应,提高巨噬细胞和脾细胞分泌NC水平(RC0.01)0.5mg/ml^」量可明显提高小鼠的免疫功能。
2.3抗肿瘤作用蚯蚓体腔液中的体腔细胞溶解因子具有类似凝集素活性, 可以抑制肿瘤细胞増殖。
蚯蚓提取物可以増强某些化学药物抗肿瘤疗效,抑制癌细胞的转移。蚯蚓 提取物还可降低血液粘稠度,改善肿瘤细胞的微循环,减少乏氧肿瘤细胞。
16从蚯蚓中提取的G90糖脂蛋白混合物,在体内能减缓肿瘤细胞的生长速 度。(2004)研究发现,不仅具有纤溶酶活性,同时具有抗氧化酶作用,从而达 到抑制肿瘤生长的作用。
2.4抗凝及溶栓作用蚯蚓提取物中含有丰富的抗凝蛋白酶即溶栓酶,主要 包括蚯蚓纤维溶解酶、蚓激酶、蚓胶质酶,动物使用可广泛影响其体内的凝血系 统和纤溶系统。研究表明,蚓激酶可以体外延长血栓形成时间,既抗凝血又不影 响止血,可用于防治各种血管栓塞类疾病。段平等(1997)181从蚯蚓中提取分离 溶栓酶用于大鼠实验,低剂量的溶栓酶对大鼠能引起纤维蛋白原平均下降45%, 凝血酶时间延长,高剂量的溶栓酶能使II、侧因子降解,起到较强的抗凝效果。
2.5伤愈作用蚯蚓提取物能加快胶原纤维的生长和成熟,促进肉芽组织的 生成与表皮生长,使动物创伤部位伤口的创面加强收缩,进而促进伤口加快愈合。
张凤春等(1998)191建立了新西兰大白兔背部创伤蚯蚓提取液治疗模型,在创伤 处滴加蚯蚓提取液,于伤5d7d10d14d进行肉眼观察,采集肉芽组织进行免疫组化 AC染色和电镜观察,结果发现使用蚯蚓提取液后创伤部位的肉芽组织中含有较 多的肌纤维母细胞,内含较多的肌动蛋白、26抗氧化作用蚯蚓抗氧化提取物在体 外自由基体系中具有较强的清除自由基的作用,且对脂质体氧化有较强的抑制作 用,动物试验表明不同浓度的蚯蚓抗氧化提取物对成年小鼠血液及肝脏的活性升 高和MDA含量减少均有不同程度的影响,并且以10倍稀释的蚯蚓抗氧化提取物 影响最显着,能有效降低小鼠体内的脂质过氧化水平并且防止体内抗氧化酶受自 由基诱导的氧化损伤,提高抗氧化酶的活性。
3结语 蚯蚓的药用价值正在被逐步开发和利用,但在动物疾病的防控研究中仍然 处于初步阶段。目前,应用于动物疾病治疗的商品化药物产品较少,且多为复方 或混合性提取物,尚未达到完全提纯的程度。蚯蚓提取物在杀伤肿瘤细胞、化学増效、辐射増效及提高机体免疫功能等 方面虽具有重要作用,但其作用机理尚不完全清楚。笔者认为深入探讨蚯蚓的药 用价值及其在兽医临床上的应用研究,意义深远。
作者:万世平,姜法铭,曹杰,龚志亮(上海市浦东新区动物疫病预防控 制中心,上海201200)