楤木皂苷抗肿瘤活性研究
楤木皂苷抗肿瘤活性研究 作者：任美萍，刘明华，陈怡，肖顺汉， 李华，章卓 【摘要】 目的研究楤木皂苷的体内外抗肿瘤作用。方法以人红白血病 细胞株k562、人肝癌细胞株hepg2、人结肠癌细胞株lovo和人乳腺癌细胞株 mda-mb-231为模型，采用cell counting kit-8 (cck-8)检测楤木皂苷的体外抗肿瘤活 性；以小鼠肝癌h22和小鼠肉瘤s180为移植性肿瘤模型，检测楤木皂苷的体内抗肿 瘤活性。结果楤木皂苷可抑制k562、hepg2，lovo和mda-mb-231的增殖，其ic50 值分别为（209.10±32.69），（273.30±20.40），（293.60±5.85），（329.67±26.42） mg · l-1，均大于30 mg · l-1；
在50，100 mg·kg-1时，楤木皂苷对小鼠肝癌h22的 抑瘤率分别为28.8%，47.06%，对小鼠肉瘤s180的抑瘤率分别为27.94%，54.92%。
结论楤木皂苷体外抗肿瘤活性弱，但体内抗肿瘤活性较强。
【关键词】 楤木皂苷；
抗肿瘤；
cck-8；
h22；
s180 abstract：objectiveto study the antitumor activity of aralia saponins in vitro and in vivo. methodsthe cytotoxicity of aralia saponins on human leukemia k562, hepatoma carcinoma hepg2，human colorectal carcinoma lovo and mammary adenocarcinoma mda-mb-231 were determined by cell counting kit-8 (cck-8) assay. the inhibitory effect of aralia saponins on tumor growth was observed by the models of hepatoma 22 (h22) and implanted sarcoma 180 (s180) in mice. resultsaralia saponins inhibited the proliferation of k562 , hepg2, lovo and mda-mb-231cells，the ic50 values were 209.10±32.69,273.30±20.40,293.60±5.85,329.67±26.42 mg · l-1, respectively, above 30 mg · l-1. at doses of 50,100 mg · kg-1，the inhibitory rates of aralia saponins on h22 and s180 were 28.8%, 47.06% and 27.94%, 54.92%, respectively.conclusionaralia saponins has a little antitumor activity in vitro, but significantly exhibits antitumor activity in vivo . key words：aralia saponins；
antitumor；
cck-8；
h22；
s180 五加科楤木属植物，其味苦、辛，性平，常以根皮入药，具有活血化淤、 祛风行气、镇痛消炎、健胃利尿、清热解毒之功效［1～3］。Www.lw881.com已 有研究表明楤木皂苷具有明显的抗肿瘤活性和提高免疫功能的作用［4］。本研究 对楤木皂苷进行了体内外抗肿瘤作用的初步研究，旨在为楤木皂苷在临床肿瘤治 疗中的应用提供实验依据。1 材料与仪器 1.1 药品与试剂 楤木皂苷由泸州医学院药物研究所提供，临用前用生理盐水配制并稀 释；
顺铂（ddp）注射液：云南个旧生物药业有限公司，批号：070601。rpmi1640 培养基：gibco公司产品；
胎牛血清：天津灏洋生物制品科技责任有限公司；
cck-8(cell counting kit-8)：碧云天生物技术研究所。
1.2 细胞株和瘤株 人红白血病细胞株k562、人肝癌细胞株hepg2、人结肠癌细胞株lovo 和人乳腺癌细胞株mda-mb-231均引自四川大学华西医学中心，采用含10%胎牛血 清的rpmi1640 ph 7.4的完全培养基，在37℃，5% co2条件下常规培养。小鼠肝癌 h22和小鼠肉瘤s180，引自四川大学华西医学中心。
1.3 动物 昆明种小鼠，18～22 g，雌性，由泸州医学院动物实验中心提供，合 格证号：川实动证第17号。
1.4 仪器 酶标仪：北京普朗新技术有限公司，型号：dnm-9602；
倒置相差显微 镜：日本olympus公司，型号：ckx41；
co2培养箱：日本sanyo公司，型号：mco-15a；
dnm-9602；
电子天平：上海民桥精密科学仪器有限公司，型号：fa1104n；
离心 机：北京医用离心机厂，型号：lg10-3a。
2 方法 2.1 cck-8检测楤木皂苷对人癌细胞增殖的抑制作用 分别取对数生长期的k562、hepg2、lovo和mda-mb-231细胞，0.25﹪ 胰酶制成单个细胞悬液，细胞浓度为1×108/l,接种于96孔板，每孔90 μl，悬浮细 胞k562接种后立即加药，其它贴壁细胞培养24 h待其贴壁后加药。每孔加药10 μl， 每个浓度3个复孔，楤木皂苷终浓度分别为31.25，62.5，125，250，500 mg · l-1， 阴性组加等体积无血清rpmi1640，继续培养48 h，每孔加入cck-8 10 μl继续培养1 h，酶标仪450 nm波长下检测各孔吸光度a值，按下列公式计算抑制率。细胞增殖抑制率%=［1-（ a给药组-a空白孔）/（ a阴性对照组-a空白孔）］×100﹪，logit 法计算半数抑制浓度（ic50）。
2.2 楤木皂苷对小鼠移植性肿瘤生长的抑制作用