泌尿系细菌L型感染及其对常用抗生素的耐药性检
泌尿系细菌L型感染及其对常用抗生素的耐药性检 【摘要】 目的 探讨泌尿系细菌l型感染情况及其对常用抗生素的耐药性， 为临床诊治提供科学依据。方法 用改良kagan培养基对临床疑为泌尿系感染者的 尿液分离培养，并对分离获得的细菌l型进行药物敏感试验。结果 泌尿系l型细菌 感染率为42.17%(35/83)，其中大肠埃希氏菌l型占37.14%(13/35)。分离出的细菌l 型对丁胺卡那霉素、庆大霉素、诺氟沙星、环丙沙星、青霉素g等耐药性较高。结论 临床对疑为泌尿系感染者应同时检测细菌及其l型，并根据药敏试验结果联 合用药，以杀菌并阻止其变为l型。
【关键词】 泌尿系感染 细菌l型 药物敏感试验 细菌l型只有在高渗环境中才能存活和增殖，在普通培养基上不能生长或 生长不良；
临床对疑为泌尿系感染的患者采用普通培养基不能分离l型病原菌， 导致漏诊或误诊[1 3]。此外，由于l型细菌的细胞壁缺陷，因而对作用于细胞壁 的抗生素呈现不同程度的耐药，给临床合理用药造成困难。本文对我院83例泌尿 系感染患者进行细菌l型分离鉴定，并测定其对常用抗生素的耐药性。
1 材料与方法 1.1 菌株来源 2005年11月至2006年5月我院住院及门诊患者尿培养为阴 性，但有尿频、尿急、尿痛等刺激症状，且伴发低热、乏力、腰痛，临床疑为泌 尿系感染者83例，其中男37例，女46例。Www.133229.COm 1.2 试剂 用l型平板，改良kagan培养基：蛋白胨20g、牛肉膏6g、氯化钠 45g、琼脂10g、蒸馏水800ml，加热溶解，调整ph至7.4，1.05kg/cm2 15min灭菌 后冷至56℃，加入灭活人血浆200ml，混匀倾注平板。
1.3 检验方法 嘱患者清洗外阴，取中段尿约5ml送检，2000r/min离心5min， 倒掉上清液，将沉渣接种于血平板和l型平板各一个，血平板置37℃、5%(体积分 数)co2培养箱中培养，低倍显微镜观察。若在培养基上观察到油煎蛋或g型菌落 时，即将培养物作直接涂片，革兰氏染色，细胞壁染色。有完整细胞壁的细菌胞 浆不着色，周边呈紫色；
细胞壁缺陷菌体的胞浆有不同程度的浓染，后者用l型 平板传代，并用药物纸片扩散法(k b法)对10种常用抗生素的最低抑菌浓度进行 分析。抗生素纸片包括丁胺卡那霉素、庆大霉素、诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙 星、头孢唑啉、头孢三嗪、头孢哌酮、红霉素、青霉素g。采用铜绿假单胞菌atcc27853、金黄色葡萄球菌atcc29212进行质控，结果判断参照美国临床标准委员会(nccls) 标准进行。
2 结 果 2.1 泌尿系感染细菌l型分离鉴定结果 从83例泌尿系感染患者尿液中分离 培养出细菌46例，检出率为55.42%；
其中细菌型11例，l型13例，细菌和l型混合 存在22例，故泌尿系l型细菌感染率为42.17%(35/83)(表1)。表1 35例l型细菌种类 分布(株数) 2.2 泌尿系感染细菌l型的药敏结果 分离出的l型细菌对丁胺卡那霉素、庆 大霉素、诺氟沙星、环丙沙星、青霉素g等耐药率较高；
对头孢唑啉、头孢三嗪、 头孢哌酮及红霉素等耐药率偏低，多数菌株敏感(表2)。
3 讨 论 细菌、真菌、放线菌、螺旋体、立克次体和衣原体等病原微生物进入机体 后，在抗生素、抗体、补体和溶菌酶等体内外因素的作用下可被诱导为l型。细 菌成为l型后，由于细胞壁缺失使抗原结构变化，致使由细菌型诱导的体液或细 胞免疫不能有效地作用于l型，逃避机体免疫系统的攻击，形成免疫耐受状态而 在宿主体内存活，此时泌尿生殖道感染的症状可暂时缓解或消失。一旦阻止细胞 壁合成的因素消除，如停止用药，其仍可返祖为原菌，重新对人体致病，引起临 床症状。因此，细菌l型的存在是泌尿生殖道感染反复发作、迁延不愈的重要原 因[1 3]。
细菌l型表面抗原成分丢失，使生化反应能力减弱，在普通等渗培养基上 生长不良或不生长，是泌尿系感染者细菌检出率低的主要原因。本文收集83例疑 为泌尿系感染者的中段尿标本，用普通培养基和l型平板同时培养，结果细菌的 检出率为55.42%，其中l型的检出率为42.17%。如不使用l型平板，其检出率仅为 13.25%。因此，临床上非常有必要对疑为泌尿系感染者进行l型细菌培养。本组 35例患者尿液中分离出l型细菌，其中大肠杆菌13例，占37.14%，居于首位。关 于大肠杆菌对泌尿系的致病，以往文献报道其侵入尿道上皮可导致菌尿症，侵入 膀胱或肾脏黏膜可引起细胞死亡，也可致膀胱炎或肾盂肾炎[4]。表2 泌尿系感 染l型细菌耐药结 抗生素的广泛应用是诱导细菌l型形成的重要因素，患者有可能开始仅为 普通细菌感染，经抗生素治疗后形成l型，导致细菌型和l型混合存在。如本组资料46例患者尿培养分离出细菌，其中细菌和l型混合存在者22例，占47.83%。由 于l型细菌的细胞壁存在不同程度的缺陷，其药物敏感性与原菌多存在差异，因 此临床治疗用药，不仅要考虑原细菌的药敏，也要考虑l型的药敏。我们采用k b 法对分离获得的l型菌株进行药敏试验，发现其对作用于细胞壁的头孢唑啉、头 孢三嗪、头孢哌酮等以及作用于核酸和蛋白质合成的红霉素等较为敏感，而对抑 制肽聚糖合成的青霉素、β 内酰胺抗生素等耐药性较高。有学者认为头孢菌素 除可影响细胞壁的合成外，对细胞膜也有一定作用；
也有学者认为头孢菌素对l 型的β 内酰胺酶较为稳定，所以不易遭受破坏[5]。
综上，临床对疑为泌尿系感染者应同时采用普通培养基和高渗培养基分离 细菌，并同时考虑二者的药物敏感情况，根据所分离到的细菌及l型药物敏感试 验结果决定用药，可以联合使用作用于细胞壁和细胞质的抗生素，以达到杀菌并 阻止其变为l型的目的。